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SP Beadose FF离子交换色谱柱图片
产品货号:
GS4775
中文名称:
SP Beadose FF离子交换色谱柱
英文名称:
SP Beadose 6FF IEC column
产品规格:
1mL|5mL|5×1mL|5×5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

CM Beadose FF琼脂糖,DEAE Beadose FF琼脂糖,Q Beadose FF琼脂糖和SP BeadoseFF琼脂糖是离子交换类型的纯化树脂,具有较好的流动性,高负荷性,高流通性以及强物理和化学稳定性。广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质核酸及多肽的分离纯化。本制品四种离子交换树脂均以高交联的6%琼脂糖为介质,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本制品适配各类中压色谱系统,如ÄKTA等。




树脂类型Q Beadose FF琼脂糖DEAE Beadose FF琼脂糖SP Beadose FF琼脂糖CM Beadose FF琼脂糖
产品编号GS4773GS4774GS4775GS4776
离子交换类型强阴离子弱阴离子强阳离子弱阳离子
总离子载量0.18~0.25mmol(Cl-)/ml树脂0.11~0.16mmol(Cl-)/ml树脂0.18~0.25mmol(H-)/ml介质0.09~0.13mmol(H-)/ml介质
电荷-N+(CH3)3-OCH2CH2N+(CH2CH3)2SO3--OCH2COO-
结合能力120mg人血清蛋白/ml树脂110mg人血清蛋白/ml树脂70mg核糖核酸酶/ml树脂50mg核糖核酸酶/ml树脂
压力/流速400~700cm/h,100kPa,
柱高15cm,内径5cm
300~600cm/h,100kPa,
柱高15cm,内径5cm
400~700cm/h,100 kPa,
柱高15cm,内径5cm
300~600cm/h,100kPa,
柱高15cm,内径5cm
pH稳定性2~14 (短期)
2~12 (长期)
2~14(短期)
2~12(长期)
3~14(短期)
4~12(长期)
2~14(短期)
4~13(长期)
基质 6%高度交联琼脂糖
化学稳定性在常用溶液中稳定:8M尿素,6M盐酸胍,70%乙醇,1M氢氧化钠,1M乙酸钠。
储存缓冲液 20%乙醇(Q,DEAE,CM),含0.2M醋酸钠的20%乙醇(SP)
粒度范围90μm(45~165μm)



组分1mL5mL5×1mL5×5mL
SP Beadose FF离子交换色谱柱1mL5mL5×1mL5×5mL
说明书1份

保存:4~8℃,不可冻存


  • Buffer的准备:
    所用水和Buffer在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
  • 样品准备:
    样品在上样前建议离心或用0.22μm或0.45μm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
  • 样品纯化:
    IEC预装柱是一种离子交换层析介质的预装柱产品,可以用各种常规的中低压色谱系统,以ÄKTA仪器使用为例介绍IEC预装柱使用方法:
    • 将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。
    • 用3~5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。
    • 使用至少5倍柱床体积的结合液平衡色谱柱。1mL预装柱推荐流速为1mL/min,5mL预装柱推荐流速为5mL/min。
    • 利用泵或注射器上样。
      注:样品的粘度增加使得即使上样体积很少,也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。
    • 用洗杂液冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10~15个柱体积)。
    • 用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。梯度洗脱可以用20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。
  • SDS-PAGE检测:
    将使用纯化产品得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE检测纯化效果。



离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的缓冲液或去离子水进行平衡至离子强度或pH值稳定。

在位清洗:
离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
去除一些沉淀或变性物质,建议使用下面的方法:
用2倍柱体积的1M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH7.4清洗。
去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质:
用3~4倍柱体积的70%乙醇或3~4倍柱体积的1% Triton X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH7.4清洗。
去除一些离子键结合物质:
用3~4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH7.4清洗。


问题原因分析推荐解决方案
柱子反压过高填料被堵塞按照上述方法进行树脂清洗。
裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上柱前使用滤膜(0.22或0.45μm)过滤,或者离心去除。
洗脱样品较杂树脂重复多次使用按照上述方法进行树脂清洗或更换新树脂
平衡不充分增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂

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